Metode Pemeriksaan Badan Inklusi HbH (Gambaran Bola Golf)

Badan inklusi eritrosit yang dianggap paling penting ada tiga, yaitu badan inklusi HbH pada thalassemia α, Heinz bodies pada penyakit haemoglobin tidak stabil (contoh pada defisiensi G6PD), dan badan inklusi rantai α pada thalassemia β mayor.

Gambaran golf ball pada pasien thalassemia alfa dengan retikulositosis

 

Heinz Bodies dan Cabot ring (panah merah)

 

Gambaran inklusi HbH pada eritrosit tampak setelah dilakukan pengecatan brilliant cresyl blue (BCB) dengan inkubasi. Gambarannya berupa titik-titik bulat berwarna biru kehijauan baik di dalam maupun di keliling luar sel dengan pola seperti bola golf. Badan inklusi ini bisa dibedakan dari retikulosit yang berwarna lebih gelap dengan titik atau filamen retikulosit yang jarang dan tidak merata. Gambaran ini merupakan pemeriksaan diagnostik untuk thalassemia alfa yang dapat dilakukan tanpa pemeriksaan molekuler atau genetik.

 

Reagen : 1.0% brilliant cresyl blue atau New methylene blue.

BCB berperan sebagai oksidan yang mendenaturasi HbH sebagai badan inklusi intraseluler

Cat brilliant cresyl blue

 

Prosedur pemeriksaan:

1. Campurkan 2 volume darah EDTA (max 24 jam setelah pengambilan) dengan 1 volume cat BCB.
  2. Inkubasi pada suhu 37°C selama 1-2 jam atau pada suhu ruang selama 4 jam
  3. Sampel dihomogenisasi kembali dan dibuat apusan darah pada preparat.
  4. Baca pada mikroskop seperti pada pemeriksaan retikulosit. Bedakan titik multipel pada badan inklusi HbH dengan retikulosit biasa.

 

Interpretasi:

Positif pada thalassemia trait α+ dan thalassemia α0. Pada thalassemia α0, gambaran golf ball dapat ditemukan dalam jumlah yang banyak, biasanya lebih dari 30% eritrosit. Pada thalassemia trait α+ lebih jarang ditemukan antara 1:1000 sampai 1:10.000 eritrosit. Tidak ditemukannya badan inklusi ini tidak bisa menyingkirkan diagnosis thalassemia trait α+

 

Cara meningkatkan sensitifitas pemeriksaan:

  • Memperlama masa inkubasi menjadi 3 jam.
  • Memperkaya fraksi eritrosit menggunakan dekstran kemudian inkubasi dengan 2% BCB selama 30-90 menit.

 

Referensi:

  • Chandra et al. Utility of screening golf ball inclusions in hemoglobin H disease and its clinico-hematological profile. Jahjournal 2017;8(4):135-139
  • Dacie and Lewis: Practical Hematology
  •  
  •  
  •  
  •  
  •  
  •  
  •  

Leave a Reply:

Your email address will not be published. Required fields are marked *